ПЦР диагностика на гепатит С

Гепатит С — воспаление клеток печени, возникающее вследствие инфицирования вирусом HCV (гепатита С) посредством контакта с кровью зараженного человека. Генетический код флавивируса HCV несет молекула РНК (рибонуклениновой кислоты), содержащаяся в структуре вируса. Это опасное для жизни пациента явление отличает скрытность на начальной стадии патологии. Временной интервал между инфицированием и появлением симптомов (реагирования иммунной системы) может составлять от одного месяца до полугода. Как правило, болезнь принимает хроническую форму и трудно поддается излечению.

Современная медицина позволяет диагностировать патологию при незначительном поражении печени. К самым распространенным и эффективным методам диагностики относится анализ ПЦР. Рассмотрим в данной статье, что это такое и какие его разновидности существуют.

Что представляет собой исследование

Анализ ПЦР на гепатит С — обследование в условиях лаборатории, выявляющее флавирус – генетический материал вируса рибонуклениновой кислоты (РНК). Оно определяет количество молекул РНК в крови, качество биологического материала, генетический тип флавируса HCV.

Загрузка образцов крови в центрифугу

Метод ПЦР при гепатите С позволяет обнаружить минимальное количество флавируса еще до формирования антител, как правило, вскоре после инфицирования.

Исследование часто именуют РНК-анализ, так как он выявляет частицы рибонуклеиновой кислоты, имеющие размер 30-60 нм, содержащиеся в флававирусе.

Исследование проводится следующим образом: натощак пациент сдает кровь из вены, которая потом тестируется разными методами:

  • Real-Time PCR проводится закрытым автоматизированным способом и имеет нижний лимит выявления вируса РНК, равный 15 МЕ/мл;
  • COBAS AMPLICOR с сенситивностью 50-100 МЕ/мл.

Чем выше порог чувствительности у диагностической методики, тем больше шансов обнаружить самое минимальное содержание вируса в исследуемом биологическом материале.

Какие разновидности анализа используют

Анализ, успешно применяемый уже несколько десятков лет называется ПЦР гепатит при этом выявляется достаточно просто и быстро. В медицине различают две методики проведения реакции, принципиально отличающиеся друг от друга:

  • качественный метод выявляет наличие в биологическом материале генетического источника определенного вируса;
  • количественный анализ измеряет число генетической материи, позволяющее определить стадию патологии или оценить эффективность проводимого терапевтического курса;
  • генотипирование определяет тип вируса, присутствующего в организме.

В целом анализ крови помогает выявить характер вирусемии и генетический тип возбудителя. Как правило, исследование проводится 1 раз в зависимости от степени чувствительности диагностической системы. При необходимости проводят повторное тестирование, используя ультрачувствительный реагент.

Качественный ПЦР

Что такое качественный ПЦР РНК на гепатит С? Суть реакции заключается в присутствии последовательности РНК гепатита, причем выполнение реакции возможно лишь в случае присутствия вирусных белков схожей этимологии в ИФА. В процессе сравнения выявляется нагрузка и возможное поражение области печени.

Отличительной особенностью данного метода является способность выявить даже наличие отдельного гена.

Следует отметить, что после получения результатов исследования ПЦР и ИФА, пациенту требуется соответствующее лечение, независимо от того, каким оказался итоговый иммуноферментный результат. Положительный свидетельствует об инфицировании, а ПЦР отрицательный — о сниженном количестве вирусных частиц относительно уровня чувствительности.

Существует несколько условий, влияющий на получение отрицательного показателя ПЦР и ИФА:

  • отсутствие соответствующих условий забора материала;
  • в полученном анализе присутствуют загрязнения;
  • в случае раннего введения пациенту инъекций гепарина.

Со стороны больного не требуется соблюдения определенных правил по забору крови на ПЦР анализ, в данном случае качество этого анализа зависит от медицинского работника, проводящего процедуру. Возможность установить присутствие заболевания (особенно в острой форме) появляется уже через несколько недель после инфицирования.

Количественный анализ

Количественный тест рекомендуется проводить для выявления вирусной нагрузки непосредственно перед формированием дальнейшей терапии и реакцией организма. Процесс забора крови проводится аналогичным образом, что при качественном ПЦР и ИФА, единственным условием является отсутствие возможности курения пациента перед процедурой.

Что касается характеристики полученных в результате изучения данных, то повышенная нагрузка характеризуется показателями от 800000 МЕ/мл, низкий — 400000 МЕ/мл. О присутствии вируса в организме пациента говорит ПЦР на гепатит не отрицательный качественный тест.

Подобного рода исследование дает возможность определить, насколько пациент опасен для окружающих его людей. Так, например, выявление высокого уровня говорит о повышенной заразности пациента. К тому же результаты анализа помогают сформировать дальнейшее наиболее эффективное лечение и определить, на сколько имеющаяся терапия считается действенной.

Быстрый отрицательный ответ тестов говорит об успешности выбранной методики, а медленное — о необходимости корректировки и использования разностороннего лечения.

Процесс проведения процедуры взятия анализа зависит от определенного дня течения заболевания. Первое определение проводится в первые сутки после поступления пациента в стационар, далее процедура повторяется на 4, 12 и 24 неделе после того, как был начат прием лекарственных средств.

Таким образом, количественный анализ показывает, какое лечение является наиболее эффективным, длительность имеющейся терапии и опасность пациента по отношению к другим людям.

Генотипирование

При исследовании материала анализа важно определить точность того генотипа вируса, который имеет место быть. В настоящее время существует 11 разновидностей вируса гепатита С, которые в свою очередь включают в себя определенные подвиды.

Все эти виды по-разному реагируют на различные способы лечения, при этом отдельные разновидности абсолютно устойчивы ко многим лекарственным препаратам.

Генотип дает возможность определить и показать состояние печени. Нередки случаи, когда в результатах записывается «не типируется», что означает, что вирус, находящийся в крови пациента не определяется данной тестовой системой. Подобное может быть выявлено в случае, если определенный генотип не соответствует данной зоне. В подобной ситуации забор анализа осуществляется повторно, при этом для исследования материала используется более чувствительная система.

Ультрачувствительный метод

Ультрачувствительный метод необходим в определенных случаях, когда диагностика гепатита не может осуществляться посредством других методов, при этом, когда сдавать анализ определяется лечащим врачом:

  • при подозрении присутствия вируса гепатита С у больных, имеющих скрытую разновидность заболевания;
  • присутствие антител относительно вируса гепатит С, не подтвержденный ПЦР-диагностикой;
  • с целью определения качества эффективности выбранной методики лечения, и подтверждения факта устранения заболевания.

Чувствительность данного метода значительно выше тех, которые обычно применяются, однако и этот метод не исключает получение ложных результатов, причем как положительных, так и отрицательных. В подобной ситуации важно контролировать качество проведения процедуры и возможность загрязнения самого материала.

Расшифровка анализа ПЦР

Расшифровка анализа проводится на основе представленных материалов, при этом в результаты лабораторных исследований включаются определенные данные, описанные выше.

Расшифровка может включать в себя выявление в анализе положительный ПЦР полимеразной цепной реакции и отрицательного значения ИФА значит, что у пациента в крови отсутствуют признаки гепатита С, однако в прошлом он перенос острую форму данного заболевания. Как правило, при диагностике специалисты прибегают к использованию именно показателей тестов ПЦР.

Подводя итог всему вышесказанному, можно сделать вывод о том, что при проведении анализа важно соблюдать все правила и рекомендации, чтобы полученные результаты были максимально точными, а на основе полученных данных можно было определить эффективность использующейся терапии и дальнейший шанс на полное выздоровление.

Похожие публикации
Adblock
detector